Калібрувальна крива

Реагенти:

Розчинити вміст одної пляшки 1 тестового набору лимонної кислоти

(кат. №Е 0139076) з водою вторинної перегонки відповідно до інструкцій, або приготувати NADH (Клас ІІ) з концентрацією 0,5 г/л.

Процедура:

2 мл води вторинної перегонки подаються піпеткою у кювету

Виміряти поглинання А₀, додати 0,1 мл розчину NADH, перемішати і

Виміряти поглинання А₁, додати 0,1 мл розчину NADH, перемішати і

і т.д.

Виміряти поглинання А₁₃, додати 0,1 мл розчину NADH, перемішати і

Виміряти поглинання А₁₄, додати 0,1 мл розчину NADH, перемішати і

Виміряти поглинання А₁₅, додати 0,1 мл розчину NADH,

Лінійність можна обчислити двома різними методами:

• обчислення коефіцієнту А, що повинно бути подібним для кожного відповідного кроку
• обчислення ΔА _корр., яке використовується для кривої поправок і яке повинно бути лінійним

Коефіцієнт А:

Щоб прийняти до уваги зростаючий об'єм кювети, коефіцієнт А потрібно поправити відповідно до наступної формули

                              ΔА х Загальний об'єм               

Коефіцієнт А =    -----------------------------------

                                3,5 х крок

Таблиця 1 показує виміряні поглинання. Коефіцієнт А для кроку 2 обчислюється наступним чином:

                              0,436 х 2,2                

Коефіцієнт А =    --------------- = 0,137

                                3,5 х 2

ΔА_корр.:

Відніміть А₀ від поглинань А₁ до А₁₅, отримаєте ΔА₁ до ΔА₁₅.

Поправте значення до остаточного об'єму 3,50 мл відповідно до наступної формули:

                     ΔА х Об'єм виміряного розчину                

ΔА_корр. =    --------------------------------------------- 

                         Остаточний об'єм

ΔА_корр. для кроку 2 обчислюється наступним чином:

                     0,436 х 2,2                

ΔА_корр. =    --------------- = 0,274 

                           3,5

Крок

мл розчину

Загальний об'єм [мл]

А_і

А₀

Дельта А

Коефіцієнт А

ΔА_корр.

0

0

2,0

0,223

0,223

0,000

ХХХХХХ

ХХХХХХ

1

0,1

2,1

0,452

0,223

0,229

0,137

0,137

2

0,2

2,2

0,659

0,223

0,436

0,137

0,274

3

0,3

2,3

0,853

0,223

0,630

0,138

0,414

4

0,4

2,4

1,028

0,223

0,805

0,138

0,552

5

0,5

2,5

1,190

0,223

0,967

0,138

0,691

6

0,6

2,6

1,336

0,223

1,113

0,138

0,827

7

0,7

2,7

1,470

0,223

1,247

0,137

0,962

8

0,8

2,8 

1,590

0,223

1,367

0,137

1,094

9

0,9

2,9

1,703

0,223

1,480

0,136

1,226

10

1,0

3,0

1,803

0,223

1,580

0,135

1,354

11

1,1

3,1

1,902

0,223

1,679

0,135

1,487

12

1,2

3,2

1,996

0,223

1,773

0,135

1,621

13

1,3

3,3

2,086

0,223

1,863

0,135

1,756

14

1,4

3,4

2,162

0,223

1,939

0,135

1,884

15

1,5

3,5

2.238

0,223

2,015

0,134

2,015